當地時間3月29日下午，英國駐歐盟大使將表明脫歐意願的信件交予歐洲理事會主席圖斯克（Donald Tusk）後，英國脫歐的程序正式展開。
英國首相文翠珊（Theresa May，台譯：德蕾莎・梅伊）在6頁書信中指，英國政府是基於選民公投結果而決定脫歐，期望未來兩年與歐盟就相關安排進行談判的同時，協商雙方在未來的夥伴關係。她又在信中警告，假如英歐未能在兩年期限內達成協議，將削弱雙方日後在反恐及安全事務上的合作。
英國向歐盟提交信件後，文翠珊於當天到英國國會作相關宣布。她對國會形容，當天是英國的歷史時刻，但強調英國並非要離開歐洲，未來還是會與歐盟建立新型、密切的夥伴關係。文翠珊坦言，脫歐將為英國帶來不良後果，但她會盡力減少震盪；她又承諾，在談判期間除了爭取對英國有利的條件，也會承擔相應義務，以促成符合英歐雙方利益的脫歐協議。
歐洲領袖回應英國啟動脫歐
自去年6月英國公投決定脫歐，至今已經過9個月。在英國終於正式提出脫歐申請後，歐盟建制及歐洲多國領袖均作出表態。
圖斯克29日接收信件後召開記者會，表示所有歐洲人、包括約一半的英國選民，均希望歐洲團結一致變得更強，而非分裂，但如今英國還是啟動了脫歐程序，在他本人而言，「實在無法假裝這是開心的一天」。但他也表示，英國脫歐還是會帶來正面效果，包括令歐盟其餘27個成員國更有決心地團結在一起。
圖斯克其後又在 Twitter 發布一張他手持英國脫歐信件的照片，附註文字：「我們已經在想念你（指英國）。」
歐洲議會議長塔亞尼（Antonio Tajani）則在 Twitter 寫道：「今天不是好日子。英國脫歐標誌着聯盟（指歐盟）的歷史新一章，但我們已作好準備、將向前邁步。期望英國未來繼續是我們的緊密夥伴。」
歐洲議會正草擬回應英國正式提出脫歐的決議案，有報導指決議案將加入字眼，以強調在歐盟27國同意下，英國仍然可以叫停脫歐程序。塔亞尼29日對傳媒講話時重申，假如英國改變意願，他相信歐盟各成員國都會支持。
歐洲議會亦於29日發表聲明，對英國脫歐表示遺憾，但強調已為今後程序做好準備，歐盟27國將團結一致，以捍衛歐盟利益。
法國總統奧朗德（François Hollande）形容，英國脫歐將對歐洲造成「情感創傷」，對英國本身則會造成「經濟創傷」。但他強調，在參與歐盟制訂對英談判策略時，法國原則上將不會支持對英國開出懲罰條件。他又表示，英國脫歐進程最終將以雙方簽訂貿易協議作結，他期望那將會是一份「盡可能最好的協議」。
德國總理默克爾（Angela Merkel）表示，德國及其他歐盟成員國都不希望這一天來臨，因為他們將失去一個「強大且重要的成員國」。但她重申，必須接受英國選民經民主公投所得出的意願，並強調當務之急是保障目前居英歐盟公民的權益。
文翠珊以反恐合作為籌碼，惹歐洲議員不滿
馬耳他總理馬斯喀特（Joseph Muscat）則關注歐盟與英國能否維持反恐及安全議題合作。他指出，英國與歐洲「始終是一家人」，無論最終達成怎樣的談判，都應共同致力於打擊恐怖主義、加強安全事務合作。
就反恐合作，歐洲議會英國脫歐談判代表霍夫斯塔特（Guy Verhofstadt）作出強硬表態。他表示，歐洲議會將不能接受英國以其軍事情報能力作為談判籌碼。「我嘗試作為一名紳士來對待一位女士（指文翠珊），因此我不希望用上『敲詐勒索』這個詞彙。」霍夫斯塔特對傳媒表示：「我認為，我們公民的人身安全實在太過重要，不能借此來討價還價。」
歐洲議會左翼黨團「社會主義者和民主人士進步聯盟」（S&D）領袖 Gianni Pittella 則強調，以人命作為談判籌碼是荒謬、不智的舉措。他直指文翠珊言論等同「勒索」，並非談判的好開始，並呼籲她儘快返回正道。