3月29日，英国首相特雷莎·梅（Theresa May）签署启动脱欧程序的文件，当天下午将致函欧洲理事会主席图斯克（Donald Tusk），以正式引用《里斯本条约》第50条、通知对方英国脱离欧盟的意愿。
按程序，图斯克收到信件后，将于48小时内向欧盟其余27个成员国提交谈判草案，27国将于下月举行特别峰会，商讨更具体的谈判方针。而欧盟与英国代表的面对面谈判，预计会在今年6月首次进行；根据《里斯本条约》第50条，除非双方同意延长谈判，否则谈判期限为两年，即英国可能于2019年3月29日正式脱离欧盟。
28日，特雷莎·梅在伯明翰出席卡塔尔投资论坛时，重申要创造“全球化英国”（Global Britain）的决心。她表示，英国即将面对多年未见的另一个历史关键时刻，在抓紧机会开创更广阔世界、担当更重要角色的同时，将不忘与数十年来团结一致的“老朋友们”维持紧密合作。她强调，英国将寻求与欧盟达成一个崭新、深入且特殊的伙伴关系。
数月后，当我坐在谈判桌前，我将会代表全英国的每一个人──青年与长者、穷人和富人、来自城市、乡镇、村落的人们。对，还有那些视这里为家的欧盟公民。
英国启动脱欧前夕，伦敦市市长萨廸克・汗（Sadiq Khan）在布鲁塞尔与欧盟委员会主席容克（Jean-Claude Juncker）、欧洲议会议长塔亚尼（Antonio Tajani）等人会面，表达对英国在脱欧后仍能与欧盟保持合作的期望。
简世德呼吁欧盟切勿为了惩罚英国、或为了向英国发出强硬信息，而提出条件差的谈判方案，因这将为英国及欧盟带来双输局面，他说：“伦敦是领先全球的金融中心之一。假如企业撤离伦敦，他们会干脆离开欧洲，而转往纽约、新加坡。”
然而，欧洲议会最大党派“欧洲人民党党团”（European People's Party Group）领袖韦伯（Manfred Weber）已经表明，英国想在脱欧谈判的同时与欧盟协商建构新关系是不现实的，相反会令谈判变得复杂。
韦伯又批评，脱欧派曾声称的脱欧会为英国经济带来好处的说法是谎言，而事实是脱欧将为英国带来沉重代价。他又表示，自英国公投至今的九个月内，欧盟及外界一直只听到英国不喜欢什么，他希望在英国正式启动脱欧程序后，能知道英国到底喜欢、想要些什么。他又警告，谈判预设的两年期限太短，根本无法达成决议。
苏格兰议会通过寻求第二次独立公投
另外，苏格兰议会在28日通过议案，授权苏格兰首席部长斯特金（Nicola Sturgeon）可以向英国政府要求在2018年秋季至2019年春季期间举行第二次独立公投。
相关议案由身兼苏格兰民族党（SNP）党魁的斯特金提出，最终以69票赞成、59票反对获得通过。她强调，英国脱欧将在各方面带来重大改变，但这些改变不应被强加于苏格兰，苏格兰人有权自决命运。
去年6月的脱欧公投中，整体结果虽然由脱欧派以约3个百分点获胜，但在苏格兰选区则有62%选民投票支持留欧。
不过，在苏格兰议会表决后，英国政府随即回应，称在英国完成脱欧程序之前，不会与苏格兰就独立公投展开谈判。英国政府苏格兰事务大臣蒙戴尔（David Mundell）更表示，所谓的“英国脱欧程序”不仅至英国于2019年正式脱离欧盟，还包括其后的过渡时期；他强调，假如苏格兰人在未了解英欧未来关系之下，就是否独立进行投票的做法并不恰当。
苏格兰再度酝酿独立公投之际，英国《泰晤士报》披露一封由英国脱欧事务大臣戴维斯（David Davis）写给北爱尔兰议会议员的信件。信件内容指，在英国脱欧后，北爱有权选择离开英国、重新与爱尔兰合并。他又解释，由于爱尔兰为欧盟成员国，合并后北爱将能跟随重返欧盟，而不必以新成员国身份申请加入，情况类似1990年东西德统一后，东德自动获得欧洲共同体（今欧盟）成员国资格。
戴维斯强调，英国政府支持北爱维持目前的宪制地位，但北爱命运最终仍需由北爱人民来决定。这也是首次有英国内阁官员表明对北爱前途的立场。