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尽管在英国政府网页签名主张就是否脱离欧盟进行第二次公投的已超过410万人，创下英国自2011年设立此项请愿制度以来的最高纪录，不过英国政府对这次公民请愿表示拒绝，称将尊重6月23日的投票结果。
脱欧公投是一代人只有一次的公投。
据 BBC 报导，每一位参与签名请愿的人都收到一封来自英国政府的电邮。电邮称，英国首相和政府已经清楚地表明“脱欧公投是一代人只有一次的公投”，英国人民应该尊重公投结果，为脱欧进程做准备；英国政府承诺，将在与欧盟的谈判中为英国民众谋得最好的出路。
主张“二次公投”的请愿是由支持留欧的英国公民 William Oliver Healey 发起，他认为此前公投投票率仅为72％，且支持脱欧的得票率也只是刚过简单多数的52％，对民意的代表性不够。他在请愿书中要求英国对重大宪政问题制定新的公投规则，投票率至少要达到75％，且获胜方必须取得60％以上的得票率才算有效。
6月27日报导：英国350万签名请愿“再次公投”，17万签名倡“伦敦独立”
随着英国脱欧派在公投中以51.9%得票率的微弱优势取得胜利后，英国将正式启动脱离欧盟。有支持留欧的英国民众因不满脱欧局面，在英国政府官网上发起请愿，要求就是否脱欧进行第二次公投，并提高通过门槛。截至香港时间27日上午6时，该请愿网页已征集到超过350万个签名，英国议会将在28日就此次请愿活动进行辩论。不过由于此项签名只需自称是英国人，提供名字、邮编并验证电邮即可完成，所以亦有人认为数字存在一定水分。
此外，还有不满脱欧结果的伦敦民众在非政府网站发起“伦敦独立”的签名，也已获得超过16万个签名。
我们签名要求英国政府实施新规：如果留欧或脱欧的得票率小于60％，且总投票率小于75％，那就应该有另外一场公投。
发起“再次公投”请愿的 William Oliver Healey 称，在6月23日的公投中，投票率仅为72％，且支持脱欧的得票率是52％，也只过了简单多数，对民意的代表性不够。他撰写的请愿书要求，英国对重大宪政问题的公投，应该制定新的规则，投票率至少要达到75％，且获胜方必须取得60％以上的得票率，才算有效。
根据规定，英国议会必须对政府网站上每一个获得超过10万签名的请愿进行辩论，保守党议员 Ben Howlett 已确认，将在6月28日议会复会当天讨论这项请愿。留欧派的工党议员 David Lammy 则表示，要通过议会投票制止英国退出欧盟。
公投结果公布后，也有不少投了脱欧票的英国选民在社交媒体上表示后悔，希望能再投一次票。其中来自英格兰的 khembe 就在 Twitter 表示，自己相信了脱欧派的谎言和虚假承诺，“我现在无比后悔，我感到自己的选票被抢走了”。英国人 Adam 接受 BBC 采访时表达的后悔言论更是已经在社交媒体“走红”：他表示没想到自己的选票真的会造成这么大的影响，“看到卡梅伦辞职的时候，说实话我真吓到了”，他还对英国接下来将面对的不稳定感到担心。
不过 BBC 和华盛顿邮报都分析指，“再次公投”的可行性不大。首先，公投规则应事先确定，而不能一方失败后再提出重新设立规则。其次，虽然超过10万人请愿必须在议会上辩论，但并不能要求议会一定要落实辩论的结果，就像此前英国议会辩论的禁止美国共和党总统准候选人特朗普（Donald Trump）入境英国的议题一样。况且脱欧阵营的总得票数超过1741万张，请愿人数尽管不少，但恐怕再次公投还会得出一样的结果。
另一项关于“伦敦独立”的请愿则由支持留欧的伦敦市民 James O'Malley 在民间网站 Change.org 上发起，所以尽管签名超过10万，也不会被英国议会辩论。
O'Malley 之所以提出“伦敦独立”，是因为伦敦在公投中表现出强烈的留欧意愿：伦敦新任市长萨迪克·汗（Sadiq Khan）大力支持留欧，伦敦共33个选区中有28个公投结果显示支持留欧，伦敦的投票率也达到了1950年大选至今所有选举中的最高。因此，O'Malley 倡议伦敦从英国独立出去，然后继续留在欧盟，“如果英格兰的其他人不同意，……就让我们正式离婚，我们去和（欧洲）大陆的朋友们住到一起”。
此外，星期日泰晤士报6月26日公布的最新民调显示，在脱欧公投中同样大力支持留欧的苏格兰，也有52％的民众希望发起第二次苏格兰独立公投。4月时，这个数字还只有30％。苏格兰首席部长 Nicola Sturgeon 于25日晚召开了议会紧急会议，她在会后表示，第二次苏格兰独立公投“是一个很值得考虑的选项”。
欧盟方面，包括德国、法国、意大利、比利时、荷兰、卢森堡在内的欧盟核心六国则于25日在德国首都柏林进行了外长间的紧急会面，一致要求英国“尽快启动脱欧进程”，以免造成政治真空。法国、荷兰、意大利、捷克等国的右翼疑欧派政党也纷纷发声，呼吁效法英国进行脱欧公投。
在英国国内，脱欧公投还造成了另一项政治后果——留欧派影子内阁工党党首科尔宾（Jeremy Corbyn）恐怕将为自己在公投拉票中摇摆不定的表态付出代价。BBC 在26日引述信源指，包括外交大臣、卫生大臣在内的半数影子内阁成员将以集体辞职为要挟，要求科尔宾下台。
声音
今天早上的现实情况让我非常后悔，我希望我能有机会再投一次票，我一定不会再做出同样的选择了。
伦敦是个国际大都市，我们希望继续留在欧洲的中心。
我本来以为我的投票没什么大作用，因为我以为我们总归是会留在欧盟的。