3月29日，英國首相文翠珊（Theresa May，台譯：德蕾莎・梅伊）簽署啟動脫歐程序的文件，當天下午將致函歐洲理事會主席圖斯克（Donald Tusk），以正式引用《里斯本條約》第50條、通知對方英國脫離歐盟的意願。
按程序，圖斯克收到信件後，將於48小時內向歐盟其餘27個成員國提交談判草案，27國將於下月舉行特別峰會，商討更具體的談判方針。而歐盟與英國代表的面對面談判，預計會在今年6月首次進行；根據《里斯本條約》第50條，除非雙方同意延長談判，否則談判期限為兩年，即英國可能於2019年3月29日正式脫離歐盟。
28日，文翠珊在伯明翰出席卡塔爾投資論壇時，重申要創造「全球化英國」（Global Britain）的決心。她表示，英國即將面對多年未見的另一個歷史關鍵時刻，在抓緊機會開創更廣闊世界、擔當更重要角色的同時，將不忘與數十年來團結一致的「老朋友們」維持緊密合作。她強調，英國將尋求與歐盟達成一個嶄新、深入且特殊的夥伴關係。
數月後，當我坐在談判桌前，我將會代表全英國的每一個人──青年與長者、窮人和富人、來自城市、鄉鎮、村落的人們。對，還有那些視這裏為家的歐盟公民。
英國啟動脫歐前夕，倫敦市市長簡世德（Sadiq Khan；台譯：薩廸克・汗）在布魯塞爾與歐盟委員會主席容克（Jean-Claude Juncker）、歐洲議會議長塔亞尼（Antonio Tajani）等人會面，表達對英國在脫歐後仍能與歐盟保持合作的期望。
簡世德呼籲歐盟切勿為了懲罰英國、或為了向英國發出強硬訊息，而提出條件差的談判方案，因這將為英國及歐盟帶來雙輸局面，他說：「倫敦是領先全球的金融中心之一。假如企業撤離倫敦，他們會乾脆離開歐洲，而轉往紐約、新加坡。」
然而，歐洲議會最大黨派「歐洲人民黨黨團」（European People's Party Group）領袖韋伯（Manfred Weber）已經表明，英國想在脫歐談判的同時與歐盟協商建構新關係是不現實的，相反會令談判變得複雜。
韋伯又批評，脫歐派曾聲稱的脫歐會為英國經濟帶來好處的說法是謊言，而事實是脫歐將為英國帶來沉重代價。他又表示，自英國公投至今的九個月內，歐盟及外界一直只聽到英國不喜歡什麼，他希望在英國正式啟動脫歐程序後，能知道英國到底喜歡、想要些什麼。他又警告，談判預設的兩年期限太短，根本無法達成決議。
蘇格蘭議會通過尋求第二次獨立公投
另外，蘇格蘭議會在28日通過議案，授權蘇格蘭首席部長施雅晴（Nicola Sturgeon）可以向英國政府要求在2018年秋季至2019年春季期間舉行第二次獨立公投。
相關議案由身兼蘇格蘭民族黨（SNP）黨魁的施雅晴提出，最終以69票贊成、59票反對獲得通過。她強調，英國脫歐將在各方面帶來重大改變，但這些改變不應被強加於蘇格蘭，蘇格蘭人有權自決命運。
去年6月的脫歐公投中，整體結果雖然由脫歐派以約3個百分點獲勝，但在蘇格蘭選區則有62%選民投票支持留歐。
不過，在蘇格蘭議會表決後，英國政府隨即回應，稱在英國完成脫歐程序之前，不會與蘇格蘭就獨立公投展開談判。英國政府蘇格蘭事務大臣萬達偉（David Mundell）更表示，所謂的「英國脫歐程序」不僅至英國於2019年正式脫離歐盟，還包括其後的過渡時期；他強調，假如蘇格蘭人在未了解英歐未來關係之下，就是否獨立進行投票的做法並不恰當。
蘇格蘭再度醞釀獨立公投之際，英國《泰晤士報》披露一封由英國脫歐事務大臣戴德偉（David Davis）寫給北愛爾蘭議會議員的信件。信件內容指，在英國脫歐後，北愛有權選擇離開英國、重新與愛爾蘭合併。他又解釋，由於愛爾蘭為歐盟成員國，合併後北愛將能跟隨重返歐盟，而不必以新成員國身份申請加入，情況類似1990年東西德統一後，東德自動獲得歐洲共同體（今歐盟）成員國資格。
戴偉德強調，英國政府支持北愛維持目前的憲制地位，但北愛命運最終仍需由北愛人民來決定。這也是首次有英國內閣官員表明對北愛前途的立場。